Тест-набор Canine VacciCheck предназначен для определения титра IgM антител в сыворотке крови собак к Парвовирусу собак (CPV) и Вирусу чумы плотоядных (CDV). Рассчитана от 1 до 12/120 определений (в зависимости от набора).

Таблица интерпретации результатов

ImmunoComb®

CANINE PARVOVIRUS & DISTEMPER IgM

ANTIBODY TEST KIT

ИНСТРУКЦИЯ

Предназначен для 12/120 исследований 18.12.2008

1. Назначение

Бесприборная ИФА тест-система   предназначена для определения титра IgM антител в сыворотке крови собак к Парвовирусу собак (CPV) и Вирусу собачей чумы (CDV).

2. Общая информация

Парвовирус собак (CPV) и Вирус собачей чумы (CDV) являются важными причинами заболеваемости и смертности у собак. Щенки наиболее подвержены CPV и CDV особенно после отлучения, когда снижается уровень защитных материнских антител. Иногда защитные материнские антитела могут мешать вакцинации, которая делается для иммунизации.

Во многих странах, программы вакцинации значительно сократили, но не устранили заболеваемость  этими  болезнями.  Таким  образом,  CPV  и  CDV  продолжают  вызывать большие клинические опасения для ветеринаров во всем мире и до сих пор представляют проблему в диагностике.

3. Что такое IMMUNOCOMB®?

Тест ImmunoComb®  является модифицированным иммуноферментным анализом, который может быть описан как точечный анализ с использованием вторичных антител, меченных ферментом,  при  котором  определяется  уровень  антител  в  сыворотке или  цельной  крови. Набор содержит все необходимые реагенты для выполнения теста. Результаты анализа IgM CPV и CDV доступны в течение 60 минут.

4. Как работает IMMUNOCOMB®?

• Набор ImmunoComb® содержит два основных компонента: Гребень в виде пластиковой карты, далее Гребень и Проявочную ванну.
• Гребень имеет 12 зубцов, рассчитанных на 12 тестов. Каждый зубец последовательно проходит   через   все   соответствующие   ячейки   каждого   ряда   Проявочной   ванны.   Для индивидуального или группового исследования отламывается необходимое количество зубцов Гребня.
• Тестовые   точки   нанесены   на   каждый   зубец   Гребня.   Верхняя   точка    —    это Положительный контроль. Очищенный CPV антиген нанесен на среднюю точку и очищенный CDV антиген — на нижнюю из 3 точек (см. рисунок в разделе X).
• На первом этапе образец сыворотки, плазмы или цельной крови вносится в ячейку ряда А Проявочной ванны.
• Далее Гребень вставляется в ячейку с образцом и переносится в оставшиеся  ячейки через определенный интервал времени в соответствии с инструкцией (рис №4). Специфичные IgМ антитела из образца при их наличии связываются с антигеном на точке зубца Гребня и помечаются в ряде С, который содержит меченные ферментом антитела к IgМ антителам собаки.
• После еще двух промывок (ряд D и E) Гребень переносится в следующую ячейку (ряд F), где проявляется цвет благодаря ферментативной реакции.
• Интенсивность цвета результата соответствует уровню антител в тестируемом образце. Результаты оцениваются с использованием точки Положительного контроля и калибровочной шкалы CombScale.

7.Процедура анализа на ИммуноКомб

Анализ проводится при температуре 200-250C (680—770F).

1. Забрать образец крови у собаки.

2. Используйте пипетку или капилляр*.

При тестировании цельной крови используйте 10 мкл При тестировании сыворотки/плазмы используйте 5 мкл

3. Используйте пинцет для вскрытия алюминиевой защитной пленки ряда А (одна ячейка для одного образца).

4. Внесите образец в ячейку ряда А. Для перемешивания поднимите и опустите пипетку/поршень несколько раз.

Не   открывайте   ячейки   ряда    А    или   других   рядов,    которые   вы   не   собираетесь использовать.

По запросу можно приобрести набор из 40 капилляров и 1 поршня.

5. Выньте гребень из защитной обертки. Для тестирования менее 12 образцов, разрежьте или отломите Гребень по меткам в зависимости от количества тестов. Вставьте Гребень в открытую ячейку/ячейки ряда А (печатной стороной к себе) и инкубируйте 20 минут. Для улучшения перемешивания аккуратно передвигайте Гребень вверх вниз в начале каждой инкубации (каждого ряда). Повторите это движение как минимум дважды во всех остальных рядах.

6. Используйте пинцет для вскрытия следующего ряда (ряд В) и вставьте Гребень на 2 ми- нуты. До перенесения Гребня из одного ряда в следующий, вскройте последующий ряд.

Удалите капли жидкости с заостренных концов зубцов Гребня с помощью чистой фильтровальной бумаги. Не прикасайтесь к фронтальной поверхности Гребня. Вставьте Гребень в следующий ряд (ряд С) на 20 минут. Переместите Гребень в оставшиеся ячейки (ряд D и E) на 2 минуты в каждой, а в последнюю ячейку (ряд F) на10 минут.  

7. По завершению проявления цвета в ряде F переместите Гребень обратно в ряд E на 2 минуты для фиксации цвета. Выньте Гребень и дайте ему высохнуть в течение 1-10 минут.

8. Чтение и интерпретация результатов

• Самая  верхняя  точка  -  точка  положительного контроля,  которая  должна  дать  четко выраженный   пурпурно-серый   цвет.   Это   тот   же   самый   тон,   что   дает    существенно положительный результат  на IgM антитела. При использовании CombScale, эта точка должна читаться как S3 (см. раздел IX) (на шкале от S0 до S6).
• Средняя точка показывает результат на CPV IgМ антитела в образце.
• Нижняя точка на Гребне показывает результат CDV IgМ антител в образце.
• Сравните  цветовой  фон  точек  на  CPV  и  CDV  с  точкой  положительного  контроля (раздельно)
• Для оценки количества антител используйте прибор  CombScale, предоставляющийся в наборе.
• Четко видимый цвет результата (темнее чем S1) считается положительным.
• Результат считается отрицательным при отсутствии цвета точки.
• Слабый цвет (≤S1) считается неубедительным

9. Чтение результатов с использованием CombScale

Значение  S  —  это  число,  которое  появляется  в  желтом  окошке,  соответствующем  цвету
тестовой точки при откалиброванном приборе по положительному контролю, соответствующему S3.

Когда Гребень полностью высохнет, откалибруйте его по шкале CombScale. Найдите тон пурпурно-серый на шкале, который наиболее близко подходит к точке Положительного Контроля (верхняя точка). Двигая желтую линейку, найдите отметку С+, появившуюся в окошке над цветом, который вы только что нашли.

Держите линейку в таком положении на протяжении всего чтения результатов. Этот шаг фактически калибрует С+ и S3, с которыми будут сравниваться точки теста.

 Удерживая  линейку,  найдите  тон  на  шкале,  который  будет  наиболее  подходить  точке результата теста (нижние точки). Значение, которое появится в окошке сверху, является оценкой CombScale (S0-S6).

Повторите этот шаг с каждой точкой теста отдельно. Другой способ чтения результатов — это использование прибора CombScan. Это программа, которая использует  компьютер и TWAIN совместимый сканер. Когда Гребень помещается в сканер, программа считывает цветовой результат в числовом значении.  CombScan помогает лаборатории   в   чтении   результатов      ImmunoComb   и   сохранении   данных.   Программа устанавливается бесплатно по запросу.

10.Пример проявленного Гребня

Производитель:
Biogal – Galed Labs, Galed 19240
M.P. Megidol, Израиль
Tel: 972-4-9898605 • Fax: 972-4- 9898690
E-mail: This email address is being protected from spambots. You need JavaScript enabled to view it. • Site: www.biogal.co.il